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潔凈室

潔凈室懸浮微生物的檢測-《潔凈室施工及驗收規(guī)范》-GB 50591-2010

發(fā)表時間:2018-06-21 19:05:30瀏覽量:

潔凈室懸浮微生物的檢測

E.8.1 懸浮微生物的采樣裝置有以下兩類:
1 采用無源采樣裝置,如培養(yǎng)皿。
2 采用有源采樣裝置,如撞擊采樣器、離心采樣器、過濾采樣器。

E.8.2 空氣潔凈環(huán)境中懸浮微生物的靜態(tài)或空態(tài)檢測前,應對各類表面進行擦拭消毒,但不得對室內(nèi)空氣進行熏蒸、噴灑之類的消毒。動態(tài)檢測均不得對表面和空氣進行消毒。

E.8.3 沉降菌檢測應符合下列要求:
1 使用直徑90mm(Φ90)的培養(yǎng)皿采樣。當采用其他直徑培養(yǎng)皿時,應使其總面積和Φ90皿總面積相當。
2 培養(yǎng)皿中灌注胰蛋白酶大豆瓊脂培養(yǎng)基,必須留樣作陰性對照。
3 培養(yǎng)皿表面應經(jīng)適當消毒清潔處理后,布置在有代表性的地點和氣流擾動極小的地點。在亂流潔凈室內(nèi)培養(yǎng)皿不應布置在送風口正下方。
4 當用戶沒有特定要求時,培養(yǎng)皿應布置在地面及其以上0.8m之內(nèi)的任意高度。
5 每一間潔凈室或每一個控制區(qū)應設1個陰性對照皿。
6 動態(tài)監(jiān)測時也可協(xié)商布點位置和高度。
7 培養(yǎng)皿數(shù)應不少于微粒計數(shù)濃度的測點數(shù),如工藝無特殊要求應大于等于表E.8.3中的最少培養(yǎng)皿數(shù),另外各加1個對照皿。

8 當延長沉降時間時,可按比例減少最少培養(yǎng)皿數(shù),為防止脫水,最長沉降時間不宜超過1h,當所需沉降時間超過1h,可重疊多皿連續(xù)采樣。除非經(jīng)過驗證,證明更長的沉降時間可以基本按比例增加菌落數(shù)。
9 培養(yǎng)皿應從內(nèi)向外布置,從外向內(nèi)收皿。
10 每布置完1個皿,皿蓋只允許斜放在皿邊上,對照皿蓋挪開即蓋上。
11 布皿前和收皿后,均應用雙層包裝保護培養(yǎng)皿,以防污染。
12 收皿后皿應倒置擺放,并應及時放入培養(yǎng)箱培養(yǎng),在培養(yǎng)箱外時間不宜超過2h。如無專業(yè)標準規(guī)定,對于檢測細菌總數(shù),培養(yǎng)溫度采用(35~37)℃,培養(yǎng)時間為(24~48)h;對于檢測真菌,培養(yǎng)溫度(27~29)℃,培養(yǎng)時間3d。
13 布皿和收皿的檢測人員必須穿無菌服,但不得穿大褂。頭、手均不得裸露,褲管應塞在襪套內(nèi),并不得穿拖鞋。
14 對培養(yǎng)后的皿上菌落計數(shù)時,應采用5~10倍放大鏡查看,若有2個或更多的菌落重疊,可分辨時則以2個或多個菌落計數(shù)。
15 當單皿菌落數(shù)太大受到質(zhì)疑時,可按以下原則之一進行處理:
1)作為壞點剔除;
2)重測,如結(jié)果仍大,以兩次平均值為準;如結(jié)果很小,可再重測;
3)重測該處微粒濃度,參考此結(jié)果作出判斷。
所有上述處理方法均應記錄在案。
16 每皿平均菌落數(shù)取到小數(shù)點后1位。
17 動態(tài)監(jiān)測時每點疊放多個平皿或采用可自動切換的儀器,每點應采滿4h以上,每皿可采30min。當只放1個皿時,可少于4h,但不可少于1h。

E.8.4 浮游菌采樣應符合下列要求:
1 使用單級或多級撞擊式采樣器、離心采樣器或過濾采樣器,采樣必須按所用儀器說明書的步驟進行,特別要注意檢測之前對儀器消毒火菌,并對培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基條做陰性對照。
2 采樣點數(shù)應不少于微粒計數(shù)濃度測點數(shù)。
3 采樣點應在離地0.8m高平面上均勻布置,或經(jīng)委托方(用戶)與檢測方協(xié)商確定。亂流潔凈室內(nèi)不得在送風口正下方布點。靜態(tài)或空態(tài)檢測前對室內(nèi)各種表面應作擦拭消毒。
4 每點采樣1次,如工藝無特殊要求,每次采樣量應大于等于表E.8.4推薦的浮游菌最小采樣量。

每次采樣時間不宜超過15min,不應超過30min。
當潔凈度很高,或預期含菌濃度可能很低時,采樣量應大于最小采樣量很多,以滿足減少計數(shù)誤差的要求。
5 采樣器應用支架固定,采樣時檢測人員應退出,手持離心式采樣器除外。檢測人員的穿戴同本附錄E.8.3條第15款。必須手持采樣器時,應將手臂伸直,站于下風向。
6 采樣后宜在2h之內(nèi)將采樣器中的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基條送入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
7 每點平均值取到小數(shù)點后1位。
8 動態(tài)監(jiān)測的測點位置、數(shù)量和高度由工藝并經(jīng)協(xié)商確定。每間潔凈室或每一個獨立受控環(huán)境中各點總采樣量,不分級別,均應大于1m3。每點可用多臺采樣器。
9 單點菌落數(shù)太大時,應按附錄E.8.3條第15款的原則處理。

E.8.5 表面染菌密度檢測應符合下列要求:
1 對于潔凈室內(nèi)圍護結(jié)構(gòu)、設備等表面的微生物采樣,應采用無菌棉拭子擦抹法,當表面很大,硬且平時,也可采用接觸皿法。
2 用規(guī)格板標定出面積為25cm2的區(qū)塊,對于圍護結(jié)構(gòu),每面結(jié)構(gòu)不少于4塊,對于設備,每件不少于2塊,取樣地點均協(xié)商確定。
3 將無菌棉拭于含10mL稀釋液試管中浸濕,于管壁上擠干后,對一區(qū)塊擦抹采樣,橫豎往返8次。每一區(qū)塊使用1根無菌棉拭。采樣后,以無菌操作方式將棉拭采樣端剪入原稀釋液試管中,經(jīng)電動混勻器震蕩20s或在手掌振打200次。
4 取含菌液體1.0mL,以瓊脂灌注法接種平皿,每個樣本接種2個平皿,于(35~37)℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(24~48)h后計數(shù)。
5 必須將本次檢測所用的稀釋液、棉拭子、培養(yǎng)基等留樣作陰性比照。
6 具體事項遵照衛(wèi)生部《消毒技術規(guī)范》執(zhí)行。
7 對于適用接觸皿采樣的表面,以無菌操作方式,先將培養(yǎng)基注入硬質(zhì)或軟質(zhì)Φ55平皿,使培養(yǎng)基表面高出培養(yǎng)皿周邊,測試時,將培養(yǎng)皿倒過來,使培養(yǎng)基表面均勻牢固地按壓住整個區(qū)域5s,不得有環(huán)形或線性的運動。
8 對于圍護結(jié)構(gòu),每面結(jié)構(gòu)應用不少于4個培養(yǎng)皿按壓,對于設備,每件用不少于2個培養(yǎng)皿按壓。
9 按壓取樣后的培養(yǎng)皿,應在2h之內(nèi),于(35~37)℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(24~48)h后計數(shù)。
10 菌數(shù)平均數(shù)取到小數(shù)點后1位。




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